乐东重组技术定义重组技术：定义原理与应用

本文目录

1. 同源重组法构建基因突变株原理？
2. 原核重组表达载体的构建原理？
3. 高考生物基因工程必备知识点？
4. 嫁接、转基因技术的区别？
5. 生物反向连接怎么做？

同源重组法构建基因突变株原理？

同源重组反应严格依赖DNA分子之间的同源性，100%重组的DNA分子之间的重组常见于非姐妹染色体之间的同源重组，称为Homologous Recombination，而小于100%同源性的DNA分子之间或分子之内的重组，则被称为Hemologus Recombination。后者可被负责碱基错配对的蛋白如原核细胞内的MutS 或真核生物细胞内的MSH2-3等蛋白质“编辑”。

同源重组可以双向交换DNA分子，也可以单向转移DNA分子，后者又被称为基因转换（Gene Conversion)。由于同源重组严格依赖分子之间的同源性，因此，原核生物的同源重组通常发生在DNA复制过程中，而真核生物的同源重组则常见于细胞周期的S期之后。

原核重组表达载体的构建原理？

大体分为一下几步：

1.设计目的片段引物（含限制性酶切位点，要求：表达载体上有而目的片段上没有的酶切位点）

2.PCR扩增片段 3.扩增后的片段与pMD18/19T克隆载体连接，通过蓝白斑筛选，提质粒并酶切鉴定；将正确连接的克隆载体重组质粒酶切，回收目的片段 4.目的片段与表达载体连接 5.转化到DH5a等克隆菌株，通过抗生素筛选，鉴定表达重组质粒。

6.测序检测 7.正确的表达重组质粒再转到表达菌株 8.表达

高考生物基因工程必备知识点？

包括基因工程的定义基因重组技术PCR技术DNA测序技术基因编辑技术等。基因工程是指利用现代生物技术手段对生物体的基因进行改造和调控的过程。基因重组技术是指将不同来源的DNA片段通过酶切和连接技术组合成新的DNA分子。

PCR技术是一种体外扩增DNA的方法，可以快速复制出特定的DNA序列。

DNA测序技术是指通过测定DNA序列来确定基因组的组成和结构。

基因编辑技术是指通过特定的酶切和连接技术对基因进行精准的编辑和修饰。以上是基本的知识点，考生需要掌握其原理和应用。

嫁接、转基因技术的区别？

一、性质不同

1、嫁接：植物的人工繁殖方法之一。

2、转基因：利用DNA重组、转化等技术将特定的外源目的基因转移到受体生物中，并使之产生可预期的、定向的遗传改变。

二、原理不同

1、嫁接原理：

嫁接时应当使接穗与砧木的形成层紧密结合，以保证接穗的成活。嫁接的枝条或芽称为接穗；嫁接的植物称为砧木或平台。接穗通常选择2个或4个芽的幼苗，然后嫁接根茎形成植株的上部或顶部，根茎成为植株的根部。

嫁接时，使两个伤面的形成层靠近并扎紧在一起，结果，细胞增殖和愈合形成一个完整的连接血管组织。这就是嫁接的原理。

2、转基因原理：

转基因即将人工分离、修饰后的D N A、基因导人生物细胞基因组，在基因表达的影响下，原生物的特性也会发生变化。

生物反向连接怎么做？

在目的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点的方法是：利用基因重组技术，讲限制性核酸内切酶识别序列连接在目的基因两侧。

一，原理：在目的基因的两侧接上限制性核酸内切酶酶切位点的原理是基因重组。此时，目的基因就相当于一段已知的脱氧核糖核苷酸序列。用dna连接酶讲限制性核酸内切酶的识别序列连接在其两端即可。

二，操作步骤：首先要找到想要的限制性核酸内切酶的识别序列，然后用pcr合成仪对这段序列进行扩增。最后再用dna连接酶连接在目的基因上即可。